Xác minh hiệu ứng khử trùng tự hấp

Một trong những dụng cụ trong phòng thí nghiệm thiết yếu trong phòng thí nghiệm vi sinh là máy khử trùng, với tự động hóa là loại được sử dụng phổ biến nhất. Theo GB 4789.1-2016, thiết bị phòng thí nghiệm nên được kiểm tra và/hoặc hiệu chỉnh thường xuyên (với ghi nhãn thích hợp), được bảo trì và phục vụ để đảm bảo hiệu suất và an toàn hoạt động. Nhưng máy khử trùng của bạn có trải qua kiểm tra tương tự không? Nếu cần xác nhận như vậy, nó nên được tiến hành như thế nào?

Hôm nay, chúng tôi sẽ tóm tắt các khía cạnh chính của xác nhận hiệu quả khử trùng cho autoclave.

Các phương pháp phổ biến để xác thực hiệu quả khử trùng nồi hấp bao gồm phương pháp chỉ báo hóa học, phương pháp nhiệt kế điểm cố định, phương pháp đầu dò nhiệt độ tự tạo và phương pháp chỉ báo sinh học. Các nguyên tắc đằng sau các phương pháp này là tương tự nhau, chủ yếu tập trung vào việc xác minh xem nhiệt độ bên trong đồng hóa có đạt đến mức cần thiết trong quá trình khử trùng hay không. Tùy thuộc vào các điều kiện cụ thể của phòng thí nghiệm, một hoặc nhiều phương pháp có thể được chọn để xác nhận.

1. Phương pháp chỉ thị hóa học
Nguyên tắc: Các chỉ số hóa học trải qua thay đổi màu sắc hoặc biến dạng khi tiếp xúc với một nhiệt độ và thời gian cụ thể, cho phép đánh giá xem các thông số khử trùng có được đáp ứng hay không.

Một chỉ số thường được sử dụng trong các phòng thí nghiệm là băng chỉ báo hấp dẫn 3M, thay đổi màu trước và sau khi khử trùng để biểu thị hiệu quả. Băng này được làm bằng các hóa chất nhạy cảm với nhiệt và các chất phát triển màu sắc được in thành các sọc trên một băng dính đặc biệt. Băng nên được áp dụng cho bên ngoài của gói, với chiều dài tối thiểu là 5 cm, và ép chắc chắn để bám dính và niêm phong tốt hơn. Sau khi khử trùng ở 121 ° C trong 20 phút hoặc 130 ° C trong 4 phút, các sọc trắng chéo trên băng sẽ chuyển sang màu đen hoàn toàn. Nếu sự thay đổi màu sắc là không đồng đều hoặc không đầy đủ, gói có thể không đáp ứng các điều kiện khử trùng.

2. Phương pháp nhiệt kế điểm cố định
Nguyên tắc: Phương pháp này sử dụng nhiệt kế thủy ngân giữ lại nhiệt độ cao nhất đạt được, tương tự như nhiệt kế lâm sàng truyền thống. Nó giúp xác định nhiệt độ tối đa đạt được bên trong nồi hấp trong quá trình khử trùng.

Để xác nhận, nhiệt kế thủy ngân được đặt bên trong một bình hình nón lớn chứa đầy nước. Trong quá trình khử trùng, bình được định vị ở cả phần trên và dưới của nồi hấp. Sau khi khử trùng, việc đọc nhiệt kế được kiểm tra so với nhiệt độ cần thiết. Tuy nhiên, phương pháp này chỉ xác minh nhiệt độ và không xác nhận liệu thời gian khử trùng có đủ hay không, làm cho nó trở thành tiêu chuẩn cơ bản nhất để xác nhận nồi hấp.

3. Phương pháp thăm dò nhiệt độ tự tạo
Nguyên tắc: Phương pháp này tận dụng các đặc điểm nóng chảy và kết tinh của một số hóa chất khi tiếp xúc với nhiệt. Bằng cách niêm phong các hóa chất này bên trong các ống thủy tinh nhỏ và đặt chúng vào nồi hấp, sự hình thành tinh thể sau khi khử trùng có thể cho biết liệu có đạt được nhiệt độ cần thiết hay không.

Một thuốc thử thường được sử dụng là axit benzoic, có điểm nóng chảy 121 121123 ° C, phù hợp với nhiệt độ khử trùng cần thiết. Trong quá trình khử trùng, axit benzoic rắn được niêm phong trong một ống thủy tinh nhỏ và đặt bên trong nồi hấp. Sau quá trình, cấu trúc tinh thể của axit benzoic được kiểm tra để xác định xem có đạt được nhiệt độ cần thiết hay không.

Giống như phương pháp nhiệt kế điểm cố định, phương pháp này chỉ cho thấy nhiệt độ và không thể xác nhận liệu thời gian khử trùng có đủ hay không.

4. Phương pháp chỉ thị sinh học
Nguyên tắc: Phương pháp này sử dụng các bào tử geobacillus stearothermophilus không gây bệnh làm sinh vật chỉ số để đánh giá hiệu quả của quá trình khử trùng nhiệt. Các bào tử này có khả năng kháng nhiệt cao và có điện trở nhiệt tương tự như các bào tử botulinum Clostridium, khiến chúng trở thành một tài liệu tham khảo đáng tin cậy để đánh giá xem liệu nồi hấp có đáp ứng các yêu cầu khử trùng hay không.

Các chỉ số sinh học có ba dạng:

Đình chỉ bào tử
Dải bào tử
Các dải bào tử kết hợp với môi trường nuôi cấy (ống chỉ báo sinh học)
Các chỉ số sinh học thường được đặt tại năm vị trí bên trong buồng khử trùng:

Cấp thấp hơn: phía trước, giữa và sau
Cấp trên: Trung tâm
Sau khi khử trùng, các chỉ số được cấy vào nước peptone tím bromocresol và ủ ở 55 nhiệt60 ° C trong 2 trận7 ngày:

Nếu môi trường nuôi cấy vẫn rõ ràng và không thay đổi về màu sắc, các bào tử đã bị giết, cho thấy việc khử trùng hiệu quả.
Nếu trung bình chuyển sang màu vàng và đục, các bào tử đã tồn tại, có nghĩa là quá trình khử trùng là không hiệu quả.
Phương pháp xác nhận tương tự áp dụng cho cả huyền phù bào tử và dải bào tử.

Nhiều phòng thí nghiệm cũng sử dụng các ống chỉ báo sinh học thương mại, hoạt động tương tự như huyền phù và dải bào tử. Những ống này chứa các bào tử G. stearothermophilus cùng với một ống kính môi trường nuôi cấy. Sau khi hấp thụ, ống thủy tinh bên trong ống được nghiền nát để giải phóng môi trường nuôi cấy và ống được ủ ở 56 ° C, với điều khiển dương.

Nếu khử trùng là không hiệu quả, các bào tử khả thi sẽ phát triển, chuyển sang màu vàng nước dùng.
Nếu triệt sản thành công, các bào tử bị bất hoạt và nước dùng vẫn còn màu tím.
Tần suất xác thực autoclave
Hiện tại, không có tiêu chuẩn quy định nghiêm ngặt xác định mức độ tự động lực thường xuyên phải được xác nhận. Tuy nhiên, các phòng thí nghiệm nên thiết lập lịch trình xác nhận của riêng họ và tuân thủ nghiêm ngặt nó.

Để dễ vận hành và xác nhận đáng tin cậy, băng chỉ báo hóa học và ống chỉ báo sinh học rất được khuyến khích. Các phương pháp này thân thiện với người dùng và cung cấp một đánh giá toàn diện về hiệu quả khử trùng.

Những cân nhắc chính để hấp
(Một số nồi hấp nhập khẩu hoàn toàn tự động có thể không yêu cầu thông gió thủ công)

Khi sử dụng nồi hấp, điều cần thiết là loại bỏ không khí lạnh khỏi buồng trong khi giới thiệu hơi nước. Thở khí nên vẫn mở cho đến khi tất cả không khí lạnh bị trục xuất, đảm bảo phân bố nhiệt độ chẵn bên trong.

Nếu bất kỳ không khí nào vẫn còn bên trong buồng, đồng hồ đo áp suất có thể chỉ ra áp suất chính xác, nhưng nhiệt độ thực tế sẽ thấp hơn dự kiến. Không khí còn lại, sự khác biệt càng lớn, dẫn đến khử trùng không hoàn toàn.

.