Xác minh hiệu quả khử trùng của nồi hấp

Một trong những dụng cụ thiết yếu nhất trong phòng thí nghiệm vi sinh là máy khử trùng, với nồi hấp (máy khử trùng hơi nước áp suất cao) được sử dụng phổ biến nhất. Theo GB 4789.1-2016, thiết bị phòng thí nghiệm nên được kiểm tra và/hoặc hiệu chỉnh thường xuyên (với thẻ kiểm tra), được bảo trì và bảo dưỡng để đảm bảo hiệu suất và an toàn hoạt động phù hợp. Nhưng autoclave của bạn có trải qua các cuộc kiểm tra như vậy không? Và nếu bạn muốn thực hiện xác minh, bạn nên làm như thế nào? Hôm nay, chúng tôi sẽ tóm tắt các phương pháp chính để xác minh hiệu quả khử trùng của nồi hấp.

Xác minh hiệu quả khử trùng nồi hấp thường bao gồm các phương pháp như chỉ số hóa học, nhiệt kế tối đa, ống nhiệt độ tự tạo và chỉ báo sinh học. Mặc dù các phương pháp này chia sẻ các nguyên tắc tương tự, chủ yếu là xác nhận liệu máy khử trùng có đạt được nhiệt độ cần thiết trong quá trình khử trùng không, bạn có thể chọn một hoặc nhiều hơn dựa trên các điều kiện cụ thể của phòng thí nghiệm của bạn.

1. Phương pháp chỉ thị hóa học

Nguyên tắc: Các chỉ số hóa học trải qua thay đổi màu sắc hoặc hình dạng trong điều kiện nhiệt độ và thời gian cụ thể. Thay đổi này được sử dụng để xác định xem các tham số khử trùng có được đáp ứng hay không.

Một vật phẩm thường được sử dụng trong các phòng thí nghiệm là băng chỉ báo hấp dẫn 3M, thay đổi màu sau khi khử trùng. Băng được làm từ hóa chất nhiệt, nhà phát triển màu và vật liệu sơn, được in theo mẫu sọc trên băng dính. Nó được áp dụng trực tiếp vào bên ngoài gói khử trùng, với chiều dài tối thiểu là 5 cm. Nhấn băng nhẹ để đảm bảo độ bám dính và niêm phong tốt. Sau khi tiếp xúc với 121 ° C trong 20 phút hoặc 130 ° C trong 4 phút, các sọc trắng chéo trên băng sẽ chuyển sang màu đen hoàn toàn. Nếu sự thay đổi màu sắc không bằng phẳng hoặc không đầy đủ, gói được coi là không được khử trùng đúng.

2. Phương pháp nhiệt kế tối đa

Nguyên tắc: Phương pháp này sử dụng nhiệt kế thủy ngân không trở về nhiệt độ thấp hơn một khi được làm nóng, tương tự như nhiệt kế y tế truyền thống. Nó chỉ ra nhiệt độ tối đa đạt được trong quá trình khử trùng.

Để xác minh, đặt nhiệt kế thủy ngân bên trong bình Erlenmeyer chứa đầy nước. Trong quá trình khử trùng, định vị bình ở phần trên và dưới của nồi hấp. Sau quá trình, hãy kiểm tra xem việc đọc của nhiệt kế có phù hợp với nhiệt độ cần thiết hay không. Phương pháp này chỉ có thể xác minh nhiệt độ và không thể xác nhận xem yêu cầu thời gian khử trùng có được đáp ứng hay không, do đó, nó đại diện cho tiêu chuẩn tối thiểu để xác minh nồi hấp.

3. Phương pháp ống nhiệt độ tự tạo

Nguyên tắc: Phương pháp này sử dụng một số hóa chất nhất định làm tan chảy và kết tinh lại ở nhiệt độ cụ thể, với các dạng tinh thể đặc biệt sau làm mát. Những hóa chất này được niêm phong trong các ống thủy tinh nhỏ và được đặt bên trong nồi hấp. Sau khi khử trùng, hình dạng tinh thể được kiểm tra để xác định xem có đạt được nhiệt độ chính xác hay không.

Axit benzoic thường được sử dụng, với điểm nóng chảy 121 121123 ° C, phù hợp với nhiệt độ khử trùng tiêu chuẩn Autoclave. Axit benzoic rắn được niêm phong trong các ống thủy tinh nhỏ và được đặt trong nồi hấp. Sau khi khử trùng, trạng thái của axit benzoic được quan sát để xác nhận xem có đạt được nhiệt độ mục tiêu hay không. Giống như phương pháp nhiệt kế tối đa, phương pháp này chỉ xác minh nhiệt độ, không phải thời gian khử trùng.

4. Phương pháp chỉ thị sinh học

Nguyên tắc: Phương pháp này sử dụng các bào tử không gây bệnh của Geobacillus stearothermophilus làm sinh vật chỉ số để đánh giá hiệu quả của quá trình khử trùng nhiệt. Các bào tử này có khả năng chịu nhiệt cao, với khả năng kháng tương tự như các bào tử botulinum clostridium gây bệnh, làm cho chúng các chỉ số phù hợp để xác minh hiệu quả khử trùng.

Các chỉ số sinh học có sẵn ở ba dạng: huyền phù bào tử, dải bào tử và ống bào tử và trung bình tích hợp. Chúng thường được đặt tại năm vị trí trong thùng chứa triệt sản: mặt trước, giữa và phía sau của lớp dưới, cũng như các điểm trung tâm của các lớp trên và giữa. Sau khi khử trùng, các chỉ số được cấy vào nước bromocresol tím-glucose-peptone và được ủ ở 55 nhiệt60 ° C trong 2 trận7 ngày. Nếu môi trường vẫn rõ ràng và không thay đổi màu sắc, các bào tử đã bị giết, cho thấy quá trình khử trùng tốt. Nếu môi trường trở nên màu vàng và đục, các bào tử sống sót, cho thấy hiệu suất khử trùng kém. Cả đình chỉ bào tử và dải bào tử đều tuân theo cùng một quá trình xác nhận.

Các ống chỉ báo sinh học thương mại cũng thường được sử dụng trong các phòng thí nghiệm. Chúng chứa các bào tử geobacillus stearothermophilus và một ống kính kín với môi trường tăng trưởng. Các ống được đặt trên khắp các thùng chứa khử trùng. Sau khi hấp dẫn, ống thủy tinh được nghiền nát để giải phóng môi trường và ống được ủ ở 56 ° C, cùng với một điều khiển dương. Nếu khử trùng là không đủ, các bào tử còn sống sẽ phát triển và chuyển sang màu vàng. Nếu khử trùng có hiệu quả, các bào tử bị bất hoạt và nước dùng vẫn còn màu tím.

Tần số xác minh

Hiện tại, không có tiêu chuẩn quốc gia nghiêm ngặt nào liên quan đến tần suất xác minh hiệu quả hấp dẫn. Các phòng thí nghiệm dự kiến ​​sẽ thiết lập lịch trình xác minh của riêng họ và tuân thủ nghiêm ngặt họ. Xem xét cả dễ sử dụng và độ tin cậy của kết quả, chúng tôi khuyên bạn nên sử dụng băng chỉ báo kết hợp với các ống chỉ báo sinh học, vì chúng cung cấp hoạt động đơn giản và xác minh toàn diện về hiệu quả khử trùng.

Ghi chú về khử trùng (không bắt buộc đối với một số lần hấp hoàn toàn tự động nhập khẩu)
Khi sử dụng một loại nước hơi áp suất cao, điều quan trọng là phải trục xuất tất cả không khí lạnh bên trong buồng khi hơi nước được giải phóng. Chỉ sau khi tất cả không khí lạnh được loại bỏ, van xả mới được đóng lại. Nếu bất kỳ không khí nào vẫn còn, đồng hồ đo áp suất có thể chỉ ra áp suất chính xác, nhưng nhiệt độ thực tế bên trong buồng sẽ giảm. Càng được giữ lại không khí, sự khác biệt giữa áp suất và nhiệt độ càng lớn, có khả năng dẫn đến khử trùng không hoàn chỉnh. .