Yêu cầu kiểm tra bào tử trong nồi hấp: Hướng dẫn toàn diện cho môi trường chăm sóc sức khỏe và phòng thí nghiệm

Phạm vi và mục đích của việc thử nghiệm bào tử trong nồi hấp

Thử nghiệm bào tử trong nồi hấp (thử nghiệm chỉ thị sinh học) xác minh rằng chu trình khử trùng bằng hơi nước có thể tiêu diệt các bào tử có khả năng kháng cự cao—điển hình là Geobacillus stearothermophilus—trong điều kiện hoạt động thực tế. Trong môi trường chăm sóc sức khỏe và phòng thí nghiệm, xét nghiệm bào tử bổ sung cho máy theo dõi vật lý và chỉ thị hóa học để xác nhận mức đảm bảo vô trùng (SAL) và đáp ứng các yêu cầu quản lý và công nhận.

Hướng dẫn này tập trung vào các yêu cầu thực tế, có thể triển khai: tần suất kiểm tra, sử dụng chỉ báo nào, quy trình công việc được xác thực, tiêu chí chấp nhận, tài liệu và khắc phục sự cố khi xảy ra lỗi.

Bối cảnh quy định và tiêu chuẩn

Các yêu cầu khác nhau tùy theo ngành và khu vực pháp lý, nhưng các điểm tham chiếu chung bao gồm ISO 11138 (chỉ số sinh học), ISO 17665 (xác nhận khử trùng bằng nhiệt ẩm), AAMI ST79 (khử trùng bằng hơi nước chăm sóc sức khỏe), hướng dẫn của CDC/HICPAC, kỳ vọng của CMS và Ủy ban hỗn hợp đối với các cơ sở chăm sóc sức khỏe cũng như các biện pháp thực hành GLP/GMP cho các phòng thí nghiệm nghiên cứu và dược phẩm sinh học. Các cơ sở nên điều chỉnh các SOP nội bộ cho phù hợp với các khuôn khổ này và quy định của địa phương.

• Chăm sóc sức khỏe: Tuân theo AAMI ST79 và các yêu cầu công nhận hiện hành; duy trì kiểm tra BI định kỳ và ghi lại các hành động khắc phục.
• Các phòng thí nghiệm và nghiên cứu lâm sàng: Phù hợp với các kỳ vọng của ISO/GMP/GLP và các chính sách an toàn sinh học của tổ chức; nhấn mạnh việc xác nhận và xác minh thường xuyên.
• Nhà sản xuất dược phẩm và thiết bị: Tích hợp việc sử dụng BI với đánh giá hiệu suất (PQ) và tái thẩm định liên tục theo quy định của hệ thống chất lượng.

Tần suất kiểm tra và kích hoạt tối thiểu

Tần suất phải đảm bảo đảm bảo vô trùng liên tục mà không làm gián đoạn hoạt động. Lịch trình thực tế sau đây cân bằng giữa rủi ro và kỳ vọng pháp lý.

• Kiểm tra BI định kỳ: Ít nhất hàng tuần trên mỗi máy tiệt trùng hơi nước trong lĩnh vực chăm sóc sức khỏe; các cơ sở có rủi ro cao hơn có thể thực hiện hàng ngày.
• Sau khi bảo trì hoặc sửa chữa: Thực hiện kiểm tra BI trước khi đưa máy tiệt trùng trở lại hoạt động.
• Sau khi di dời, lắp đặt hoặc thay đổi lớn về tiện ích: Tiến hành đánh giá chất lượng lắp đặt (IQ), đánh giá hoạt động (OQ) và PQ dựa trên BI.
• Thay đổi chu trình: Bất kỳ thay đổi nào về cấu hình tải, thông số chu trình hoặc bao bì đều đảm bảo phải xác minh lại BI.
• Trình kích hoạt dựa trên sự kiện: Thử nghiệm BI sau khi có bất kỳ chỉ báo hóa học nào bị lỗi, thử nghiệm Bowie-Dick đáng ngờ, bản in vật lý bất thường hoặc tải trọng ướt.

Lựa chọn chỉ thị sinh học

Chọn các BI được thiết kế để khử trùng bằng nhiệt ẩm có chứng nhận lô có thể truy nguyên và đặc tính kháng phù hợp. Mục tiêu là thử thách chu trình với lượng vi sinh vật đã được tiêu chuẩn hóa và đã biết.

• Sinh vật: bào tử Geobacillus stearothermophilus cho chu trình hơi nước (thường ở 121–134°C).
• Định dạng: BI độc lập (ống/lọ chứa môi trường tăng trưởng) để sử dụng trong thực tế lâm sàng; dải BI cho các nghiên cứu xác nhận trong phòng thí nghiệm.
• Điện trở: Xác nhận giá trị D ở nhiệt độ liên quan (ví dụ: D121°C) và giá trị z từ chứng chỉ của nhà sản xuất.
• Truy xuất nguồn gốc lô hàng: Giữ lại giấy chứng nhận phân tích (COA) với số lượng quần thể, giá trị D, hạn sử dụng, điều kiện bảo quản.
• Thời gian đọc: BI đọc nhanh (1–3 giờ) hỗ trợ phát hành nhanh hơn; thời gian ủ tiêu chuẩn (24–48 giờ) vẫn được chấp nhận để theo dõi thường xuyên.

Cấu hình vị trí và tải

Vị trí BI phải thách thức những vị trí khó khử trùng nhất. Vị trí kém có thể che giấu những bất cập trong chu kỳ, dẫn đến sự tự tin sai lầm.

• Các khu vực trong trường hợp xấu nhất: Sâu bên trong bộ dụng cụ, gói dệt dày đặc, hộp đựng được bọc hoặc lumens; khối lượng trung tâm của tải chứ không phải các cạnh.
• Tải đại diện: Kiểm tra cấu hình nặng nhất, dày đặc nhất hoặc phức tạp nhất được xử lý thường xuyên.
• Nhiều BI: Sử dụng ít nhất một BI; xem xét các thiết bị bổ sung cho các buồng lớn hoặc tải hỗn hợp để lấy mẫu nhiều điểm lạnh.
• Tích hợp các chỉ thị hóa học: Ghép nối các bộ tích hợp hóa học Loại 5 với BI để cung cấp phản hồi trực quan ngay lập tức trong khi ủ kết quả nuôi cấy.

Quy trình kiểm tra đã được xác thực

Kiểm tra trước chu kỳ

Xác minh chất lượng nước, độ sạch của buồng, tính toàn vẹn của bao bì và thử nghiệm Bowie-Dick (đối với máy tiệt trùng trước chân không) trước đó đã đạt hay chưa. Xác nhận khối lượng phù hợp để khử trùng bằng hơi nước và các dụng cụ đã được làm sạch và sấy khô.

Chuẩn bị và bố trí BI

Ghi lại lô BI và ngày hết hạn. Đặt BI bên trong phần khó nhất của tải (ví dụ: bên trong khay được bọc, giữa gói hàng dệt hoặc trong bộ mô phỏng lumen). Bao gồm BI đối chứng chưa được khử trùng để so sánh quá trình ủ.

Chạy chu trình với các thông số thích hợp

Sử dụng chu trình đã được xác nhận (ví dụ: 132–134°C trong 4 phút đối với dụng cụ được bọc hoặc 121°C trong 30 phút đối với một số tải nhất định) theo IFU của nhà sản xuất và SOP của cơ sở. Đảm bảo quá trình sấy khô hoàn tất để tránh gói ướt.

Ủ và đọc kết quả

Ủ BI đã xử lý và đối chứng chưa xử lý trên mỗi IFU BI. Đối với BI đọc nhanh, hãy tuân theo các quy trình thay đổi màu sắc hoặc huỳnh quang được chỉ định. Kết quả tăng trưởng âm trong BI đã xử lý cùng với mức tăng trưởng đối chứng dương cho thấy thử nghiệm đã đạt.

Tài liệu và phát hành

Ghi lại các thông số chu trình (thời gian, nhiệt độ, áp suất), chi tiết BI, vị trí và kết quả. Trong quá trình xử lý vô trùng trong chăm sóc sức khỏe, không giải phóng tải trọng quan trọng cho bệnh nhân sử dụng cho đến khi kết quả BI chấp nhận được được xác nhận, trừ khi cho phép ngoại lệ được ghi lại, được quản lý rủi ro.

Tiêu chí chấp nhận và giải thích

Kết quả đạt yêu cầu BI đã xử lý không tăng trưởng trong khi điều khiển chưa được xử lý hiển thị tăng trưởng. Các chất chỉ thị hóa học phải đạt đến điểm cuối và màn hình vật lý phải phản ánh chính xác các thông số chu trình.

• Đạt: BI đã xử lý âm tính, BI kiểm soát dương tính; hồ sơ vật lý trong phạm vi cho phép; chỉ tiêu hóa học được thông qua.
• Thất bại: Mọi BI đã xử lý đều cho thấy sự tăng trưởng hoặc mức kiểm soát không tăng trưởng; coi như một sự thất bại trong quá trình khử trùng và bắt đầu các hành động khắc phục.
• Không rõ ràng: Các kết quả đọc không nhất quán (ví dụ: huỳnh quang đường biên); lặp lại với BI mới và giữ lại các tải bị ảnh hưởng cho đến khi được giải quyết.

Hành động khắc phục lỗi BI

Lỗi BI báo hiệu khả năng gây chết người không đủ. Phản hồi bằng hoạt động điều tra, ngăn chặn và kiểm tra lại có cấu trúc trước khi tiếp tục các hoạt động thông thường.

• Cách ly: Giữ và thu hồi tất cả các tải kể từ BI được biết đến lần cuối; ngăn chặn việc sử dụng bệnh nhân hoặc triển khai phòng thí nghiệm.
• Xác minh các biện pháp kiểm soát: Xác nhận sự phát triển của BI kiểm soát và loại trừ các lỗi xử lý BI hoặc các chỉ báo đã hết hạn.
• Phân tích nguyên nhân gốc rễ: Xem xét các bản in chu trình, chất lượng hơi nước, rò rỉ không khí, cách nạp, đóng gói và bảo trì buồng.
• Xác nhận lại: Thực hiện Bowie-Dick (nếu có), lặp lại thử nghiệm BI với tải trọng trong trường hợp xấu nhất và xác minh các thông số trước khi phát hành.
• Tài liệu: Ghi lại hoạt động điều tra, hành động khắc phục và kết quả cho hoạt động kiểm tra và cải tiến liên tục.

Tích hợp BI với các công cụ giám sát khác

Thử nghiệm bào tử là một trụ cột của chương trình đảm bảo đa phương thức. Việc kết hợp các chỉ số sẽ tăng cường khả năng phát hiện và ngăn chặn các kết quả âm tính giả.

• Màn hình vật lý: Các bản ghi nhiệt độ, áp suất và thời gian phơi nhiễm từ biểu đồ/bản in của máy tiệt trùng hoặc bộ ghi dữ liệu.
• Các chỉ báo hóa học: Bộ tích hợp bên ngoài (phơi nhiễm gói) và bên trong Loại 4–5 để xác nhận các thông số gói và mức tải.
• Thử nghiệm Bowie-Dick: Kiểm tra loại bỏ không khí hàng ngày và kiểm tra độ thâm nhập của hơi nước đối với máy tiệt trùng trước chân không.
• Thiết bị thử thách quy trình (PCD): Các tổ hợp được tiêu chuẩn hóa mô phỏng các điều kiện trong trường hợp xấu nhất để bố trí BI nhất quán.

Tài liệu, truy xuất nguồn gốc và sẵn sàng kiểm toán

Tài liệu mạnh mẽ hỗ trợ việc tuân thủ và điều tra nhanh chóng. Hệ thống điện tử hợp lý hóa khả năng truy xuất nguồn gốc trên các tải, chỉ báo và sự kiện bảo trì.

• Lưu trữ hồ sơ: Các thông số chu trình, lô BI/hết hạn, vị trí, ID máy ấp trứng, thời gian đọc và diễn giải cuối cùng.
• Liên kết: Liên kết kết quả BI với các tải, khay, trường hợp bệnh nhân (chăm sóc sức khỏe) hoặc lô thí nghiệm (phòng thí nghiệm) cụ thể.
• Lưu giữ: Lưu giữ hồ sơ theo chính sách và các mốc thời gian quy định; lưu trữ COA và nhật ký bảo trì.
• Đánh giá: Đánh giá nội bộ định kỳ và xu hướng kết quả BI để phát hiện các vấn đề tái diễn và cải thiện SOP.

Yêu cầu về năng lực và đào tạo của nhân viên

Nhân viên có năng lực đảm bảo kết quả đáng tin cậy. Đào tạo nên kết hợp lý thuyết với thực hành thực hành và đánh giá năng lực.

• Định hướng: Nguyên tắc khử trùng bằng hơi nước, khoa học BI và tài liệu tham khảo tiêu chuẩn (AAMI ST79, ISO 11138).
• Kỹ thuật: Xử lý, đặt, ủ và giải thích BI đúng cách, bao gồm cả việc sử dụng chất kiểm soát.
• Xử lý sự cố: Nhận biết các điểm bất thường trong chu trình, gói ướt, rò rỉ không khí và ghi lại các phương pháp hay nhất.
• Năng lực: Đánh giá ban đầu và định kỳ với các lần chạy BI được quan sát và ghi lại các đánh giá.

Cân nhắc về môi trường và thiết bị

Hiệu suất của máy tiệt trùng phụ thuộc vào thiết kế buồng, chất lượng hơi nước và độ ổn định của tiện ích. Các yếu tố môi trường có thể ảnh hưởng trực tiếp đến kết quả BI.

• Chất lượng hơi nước: Tỷ lệ khô thích hợp và giới hạn khí không ngưng tụ; tránh quá nhiệt và đảm bảo loại bỏ không khí đầy đủ.
• Bốc xếp, đóng gói: Tránh quá tải; sử dụng màng bọc đã được xác nhận, thùng chứa cứng và khoảng cách thích hợp để hơi nước xâm nhập.
• Bảo trì: Kiểm tra miếng đệm định kỳ, hiệu suất của hệ thống chân không, bộ lọc cống và hiệu chỉnh cảm biến.
• Tiện ích: Cung cấp nước, thoát nước và khí nén ổn định (nếu có) để ngăn chặn sự thay đổi chu kỳ.

Tham khảo nhanh: Tóm tắt các yêu cầu

Bảng dưới đây tóm tắt các yêu cầu cốt lõi dành cho các nhóm bận rộn trong môi trường chăm sóc sức khỏe và phòng thí nghiệm.

Lời khuyên thiết thực cho các nhóm chăm sóc sức khỏe và phòng thí nghiệm

Sự nhất quán và chú ý đến từng chi tiết mang lại kết quả đáng tin cậy. Các biện pháp thực hành sau đây làm giảm độ biến thiên và tốc độ giải quyết khi xảy ra sự bất thường.

• Chuẩn hóa sơ đồ vị trí BI cho các tải thông thường; đưa ảnh vào SOP.
• Kết quả Trend BI theo máy tiệt trùng, loại chu trình và cấu hình tải để xác định các mẫu.
• Sử dụng BI đọc nhanh để giảm thiểu thời gian lưu giữ các dụng cụ quan trọng đối với bệnh nhân trong khi vẫn duy trì độ chính xác.
• Tiến hành thử nghiệm thử thách buồng định kỳ với PCD để xác minh hiệu quả loại bỏ không khí.
• Căn chỉnh lịch bảo trì với các cửa sổ kiểm tra BI để đẩy nhanh quá trình xác thực sau dịch vụ.

Bài học chính

Thử nghiệm bào tử là bằng chứng rõ ràng về hiệu quả khử trùng bằng hơi nước. Thiết lập lịch trình dựa trên rủi ro, chọn các chỉ số có thể theo dõi, đặt BI ở những vị trí trong trường hợp xấu nhất, ghi chép tỉ mỉ và hành động dứt khoát khi xảy ra lỗi. Đội ngũ nhân viên được đào tạo và giám sát tích hợp đảm bảo rằng cả môi trường chăm sóc sức khỏe và phòng thí nghiệm đều duy trì sự đảm bảo vô trùng đáng tin cậy.